túi nhựa có thể đóng kín, niêm phong và bảo quản ở 2-8°C để sử dụng sau.
2. Thêm chất chuẩn và mẫu:
2. 1 Giếng trắng: Không thêm thuốc thử.
2. 2 Giếng chất chuẩn: Thêm 100 µL chất chuẩn vào các giếng kiểm soát được chỉ định.
2.3 Giếng xét nghiệm: Thêm 100 µL dung dịch pha loãng mẫu vào các giếng xét nghiệm, sau đó thêm 10 µL mẫu vào giếng tương ứng.
2.4 Lắc nhẹ tấm trong 20 giây, sau đó đậy tấm bằng màng bọc.
3. Ủ: Ủ tấm ở 37°C trong 30 phút.
4. Bước rửa (Có thể thực hiện thủ công hoặc bằng máy rửa tự động):
Rửa thủ công: Cẩn thận loại bỏ hỗn hợp ủ bằng cách đổ dung dịch vào thùng rác. Đổ đầy mỗi
giếng với 350 µL dung dịch rửa đã pha loãng và lắc nhẹ trong 20-30 giây. Loại bỏ hoàn toàn dung dịch rửa. Lặp lại thêm 4
lần nữa. Sau khi hoàn thành bước rửa cuối cùng, gõ nhẹ tấm lên giấy thấm để loại bỏ chất lỏng còn sót lại.
Rửa tự động: Máy rửa tấm tự động phải được hiệu chuẩn để đảm bảo rửa hiệu quả. Đổ đầy mỗi giếng với 350 µL
dung dịch rửa đã pha loãng và ngâm trong 20-30 giây. Hút hết dung dịch khỏi tất cả các giếng. Lặp lại thêm 4 lần nữa.
5. Liên hợp: Thêm 100 µL liên hợp vào mỗi giếng trừ Giếng trắng.
6. Ủ: Đậy các giếng và ủ ở 37°C trong 30 phút.
7. Bước rửa: Rửa tấm 5 lần như mô tả trong bước 4.
8. Chất nền: Thêm 50 µL Chất nền A và 50 µL Chất nền B vào mỗi giếng, bao gồm cả Giếng trắng. Lắc nhẹ
các giếng micro trong 20 giây. Ủ ở 37°C trong tối trong 15 phút.
9. Dung dịch dừng: Thêm 50 µL Dung dịch dừng vào mỗi giếng. Một màu vàng sẽ xuất hiện trong các giếng chứa mẫu dương tính.
10. Đọc kết quả: Đọc ở bước sóng 450/630-700 nm trong vòng 30 phút.
1. Lưu ý: Có thể đọc microplate ở bước sóng 450 nm, nhưng rất khuyến khích đọc ở bước sóng 450/630-700 nm để
có kết quả tốt hơn.
DIỄN GIẢI KẾT QUẢ