2Loãng bơm đệm rửa với tốc độ loãng 1:40 với nước cất trước khi sử dụng.
3. Thêm 100μL Diluent mẫu trong giếng tương ứng (Đừng thêm trong giếng trống, âm
Các giếng kiểm soát và giếng kiểm soát tích cực.)
tấm, mỗi tấm nên được cung cấp với kiểm soát âm 2 giếng, kiểm soát tích cực 1 giếng và trống
kiểm soát 1 giếng. thêm 5μL mẫu trong giếng tương ứng, trộn kỹ bằng cách sử dụng ống dẫn, thêm
50μL kiểm soát âm và kiểm soát tích cực để kiểm soát âm giếng và kiểm soát tích cực giếng (Không
thêm trong giếng trống).
Lưu ý: Sử dụng một đầu pipette loại bỏ riêng biệt cho mỗi mẫu, kiểm soát âm và dương để
tránh nhiễm trùng chéo.
4. lắc nhẹ để trộn trong 30s. ủ ở 37 °C trong 20 phút với màng tấm niêm phong
niêm phong tấm đĩa.
5. Sau khi ủ xong, tháo và vứt nắp đĩa.
mỗi giếng trong 20 giây. Lặp lại 5 lần. Sau chu kỳ rửa cuối cùng, biến đĩa sang
giấy sơn hoặc khăn lau sạch, và nhấn nó để loại bỏ bất kỳ dư thừa nào.
6. tương ứng thêm Enzyme Conjugate 50μL (Đừng thêm trong giếng trống)
7. ủ ở 37 °C trong 20 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.
bước rửa trong 5 lần như ở bước 5.
8Thêm chất nền A 50μL và chất nền B 50μL (Đừng thêm trong giếng trống).
10 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.
9Thêm 50μL dung dịch dừng vào mỗi giếng (Đừng thêm vào giếng trống).
Kiểm tra máy đọc đĩa bằng máy đọc đĩa trống.
Nếu sử dụng một công cụ lọc kép, đặt các tham chiếu
thiết lập không có lỗ trống được phép nếu sử dụng hai bước sóng để phát hiện.
Giá trị cắt và đánh giá kết quả.
Chronometry: Đọc mật độ quang học (OD) của mẫu ở 450nm bằng máy đọc đĩa vi mô.
Giá trị OD trung bình của kiểm soát âm ≤ 0,1 và giá trị OD trung bình của kiểm soát tích cực ≥ 0.8, thử nghiệm là hợp lệ,
Nếu không, xét nghiệm không hợp lệ.
Giá trị cắt (CO) = Giá trị OD trung bình của kiểm soát âm x 3 (Được tính bằng 0,10 khi giá trị trung bình
Giá trị OD của kiểm soát âm là < 0.10, được tính bằng giá trị thực tế khi kiểm soát âm trung bình OD
giá trị là > 0,10)
Kết quả tích cực: Giá trị OD mẫu ≥ CO