Kháng thể chống lại kháng nguyên lõi virus viêm gan B (HBcAb)

ELISA TlàKnó

Chỉ dùng để chẩn đoán in vitro và sử dụng chuyên nghiệp.

Tên của sản phẩm

Bộ thử nghiệm ELISA chống HBc (Serum/Plasma)

Ứng dụng dự định

Bộ thử nghiệm ELISA chống HBc này là một phát hiện chất lượng của kháng thể đối với kháng nguyên lõi virus viêm gan B (HBcAb) trong huyết thanh / huyết tương của con người.Chất phản ứng này phù hợp cho sàng lọc lâm sàng và chẩn đoán nhiễm virus viêm gan B trong huyết thanh / huyết tương người.

Nguyên tắc thử nghiệm

Virus viêm gan B (HBV) là một phong bì,virus DNA hai chuỗi thuộc gia đình Hepadnaviridae và được công nhận là nguyên nhân chính gây viêm gan truyền qua máu cùng với virus viêm gan C (HCV)Nhiễm HBV gây ra một loạt các biểu hiện lâm sàng từ bệnh nhẹ, không rõ ràng đến viêm gan fulminate, bệnh gan mãn tính nghiêm trọng,trong một số trường hợp có thể dẫn đến xơ gan và ung thư ganViệc phân loại nhiễm trùng viêm gan B đòi hỏi phải xác định một số dấu hiệu huyết thanh được biểu hiện trong ba giai đoạn (chuyên sâu, cấp tính và hồi phục) của nhiễm trùng.

Thành phần chính của virus là kháng nguyên lõi viêm gan B (HBcAg).Kháng nguyên lõi này bao gồm một polypeptide duy nhất khoảng 17kD được giải phóng khi phân hủy các hạt lõiÍt nhất một yếu tố quyết định miễn dịch có mặt trong kháng nguyên.

Ngay sau khi bắt đầu HBsAg, các kháng thể chống lại HBcAg (tổng kháng thể và IgM chống lại HBc) xuất hiện và không bao giờ biến mất.nhiễm viêm gan B có thể bị nhiễm bệnh mà không có kháng HBc có thể phát hiện miễn dịchĐiều này thường được tìm thấy ở những bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch. Việc sàng lọc kháng HBc mang lại dữ liệu về tỷ lệ mắc viêm gan B ở các nhóm người khác nhau.bệnh mãn tính, hoặc nhiễm trùng HBV đã được giải quyết. Việc xác định kháng HBc là rất quan trọng khi được chẩn đoán trong một môi trường lâm sàng. Cùng với các xét nghiệm viêm gan B khác,dấu hiệu chống HBc cho phép chẩn đoán chính xác và theo dõi đúng tiến triển của virus. kháng HBc có thể là chỉ số duy nhất cho nhiễm viêm gan B (bao gồm các xét nghiệm khác của bệnh nhân HBsAg âm tính).

Hệ thống thử nghiệm HBcAb ELISA dựa trên nguyên tắc cạnh tranh trong pha rắn, ủ một bước.nó cạnh tranh với kháng HBc đơn clonal kết hợp với peroxidase cải thảo (HRP-Conjugate) cho một lượng HBcAg tinh khiết được phủ sẵn trong microplateNếu không có kháng HBc, kháng HBc kết hợp HRP sẽ liên kết với kháng nguyên bên trong các hố. Trong quá trình rửa, bất kỳ HRP-Conjugate không liên kết nào cũng được loại bỏ.Sau khi các dung dịch chromogen A và B được thêm vào giếng và trong quá trình ủ, một sản phẩm màu xanh xuất hiện. Sau khi phản ứng được dừng lại với axit sulfuric, màu xanh trở thành màu vàng. Sự hiện diện của kháng thể HBcAg trong mẫu được chỉ ra bằng màu thấp,hoặc không có màu nào cả.

Yêu cầu về mẫu

1.Thu thập mẫu vật:Không cần chuẩn bị đặc biệt của bệnh nhân. Thu thập mẫu theo thực tiễn phòng thí nghiệm thông thường. Hoặc mẫu huyết thanh / huyết tương tươi có thể được sử dụng với xét nghiệm này.Máu thu thập bằng tĩnh mạch nên được cho phép đông máu tự nhiên và hoàn toàn ¢ huyết thanh phải được tách khỏi cục đông máu càng sớm càng tốt để tránh huyết phân của hồng cầuCần phải cẩn thận để đảm bảo rằng mẫu huyết thanh / huyết tương trong suốt và không bị nhiễm vi sinh vật.

2.HCác mẫu có bệnh nhiễm mỡ, u nang hoặc bạch huyết không nên được sử dụng. sử dụngvì chúng có thể đưa ra kết quả sai trong xét nghiệm.Đừng làm mất hiệu lực bởi nhiệt mẫu vậtĐiều này có thể gây ra sự suy giảm của analyte mục tiêu.

3. HBcAb ELISA chỉ được dùng để kiểm tra các mẫu huyết thanh/ huyết tương riêng lẻ. Không sử dụng xét nghiệm để kiểm tra các mẫu xác chết, nước bọt, nước tiểu hoặc các chất lỏng khác của cơ thể, hoặc máu kết hợp (trộn).

4Giao thông và Lưu trữ: Lưu trữ các mẫu ở nhiệt độ 2-8 °C. Các mẫu không cần thiết cho xét nghiệm trong vòng 3 ngày nên được lưu trữ đông lạnh (-20 °C hoặc thấp hơn).Để vận chuyển, các mẫu nên được đóng gói và dán nhãn theo các quy định tại địa phương và quốc tế hiện hành về vận chuyển các mẫu lâm sàng và các tác nhân sinh học.

Phương pháp thử nghiệm

1. Tất cả các chất phản ứng nên được cho đến nhiệt độ phòng trong 15 phút trước khi sử dụng.

2Loãng bơm đệm rửa với tốc độ loãng 1:40 với nước cất trước khi sử dụng.

3Các mẫu nên tương ứng với số lượng microplate, mỗi tấm nên được cung cấp với kiểm soát âm 3 giếng, kiểm soát tích cực 2 giếng và kiểm soát trống 1 giếng.(Nếu phát hiện với phát hiện hai bước sóng, không được phép đặt giếng kiểm soát trống).

Lưu ý: Sử dụng một đầu ống xử lý riêng biệt cho mỗi mẫu, kiểm soát âm và dương để tránh nhiễm trùng chéo.

4. Thêm 50μL mẫu trong giếng tương ứng (Khi bộ dụng cụ này được sử dụng để chẩn đoán lâm sàng phụ trợ, mẫu được thử nghiệm nên được pha loãng với dung dịch muối bình thường ở 1:30 để thử nghiệm.Khi nó được sử dụng cho nghiên cứu dịch tễ học, mẫu ban đầu có thể được phát hiện ), thêm 50μL kiểm soát âm và kiểm soát tích cực vào các giếng kiểm soát âm và giếng kiểm soát tích cực.Tương ứng thêm Enzyme Conjugate 50μL (Đừng thêm trong giếng trống).

5. lắc trong 30 giây với một bộ dao động (Bước này rất quan trọng). ủ ở 37 °C trong 30 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.

6. Vào cuối thời gian ủ, tháo và loại bỏ nắp đĩa. Tháo ra, thêm đệm rửa vào mỗi giếng trong 20 giây. Lặp lại 5 lần. Sau chu kỳ rửa cuối cùng,Chuyển tấm lên giấy bôi hoặc khăn lau sạch, và nhấn nó để loại bỏ bất kỳ dư thừa.

7. Thêm chất nền A (50μL) và chất nền B (50μL) (Đừng thêm vào giếng trống). Trộn nhẹ nhàng bằng cách lắc. ủ ở 37 °C trong 15 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.

8. Thêm 50μL dung dịch dừng vào mỗi giếng (Đừng thêm vào giếng trống). trộn nhẹ bằng cách lắc, đọc độ hấp thụ trong vòng 10 phút sau khi ngừng phản ứng.Chuẩn đoán các máy đọc đĩa với Blank tốt và đọc độ hấp thụ ở 450nmNếu sử dụng một thiết bị lọc kép, hãy đặt bước sóng tham chiếu ở 630nm. Không được phép đặt các hố trống nếu sử dụng bước sóng kép để phát hiện. Tính toán giá trị cắt và đánh giá kết quả.