25-OH Vitamin D ELISA Test KIT

Ứng dụng dự định

Bộ phát hiện vitamin D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA). Nó được sử dụng trong các xét nghiệm định lượng cho vitamin D trong huyết thanh người.

Tóm tắt và ý nghĩa lâm sàng

 Vitamin D là một tiền chất hormone hòa tan trong chất béo được sản xuất chủ yếu thông qua phơi nhiễm ánh sáng mặt trời trên da.Cơ thể chúng ta chỉ có thể tổng hợp vitamin D3Vitamin D2 có thể được dùng thông qua thực phẩm hoặc chất bổ sung.vitamin D3 và D2 liên kết với protein liên kết vitamin D (VDBP) trong huyết tương và được vận chuyển đến gan để trở thành 25-hydroxyvitamin D (25-OH vitamin D)Vì vitamin D 25-OH là dạng lưu trữ chính, nồng độ máu của nó có thể được sử dụng để đánh giá tình trạng vitamin D tổng thể. Hơn 95% vitamin D 25-OH có thể đo được trong huyết thanh là vitamin D3,Trong khi vitamin D2 25-OH chỉ đạt mức độ đo lường ở những bệnh nhân dùng bổ sung vitamin D2. Vitamin D rất cần thiết cho sức khỏe xương. Ở trẻ em, thiếu hụt nghiêm trọng có thể dẫn đến bệnh hạch.Ở người cao tuổiNgoài ra, nồng độ vitamin D 25-OH thấp có liên quan đến mật độ xương thấp.Thiếu vitamin D cũng có liên quan đến bệnh tiểu đườngCác chất bổ sung vitamin D hiện đang có trên thị trường (vitamin D2 và vitamin D3) được chuyển đổi thành vitamin D 25-OH trong gan.Tổng nồng độ 25-OH vitamin D2 và 25-OH vitamin D3 trong huyết thanh hoặc huyết tương được gọi là "tổng 25-OH vitamin D"Trong môi trường lâm sàng, việc giám sát chính xác tổng lượng vitamin D 25-OH là rất quan trọng. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicTổng phân tích vitamin D sử dụng các kháng thể cụ thể để nắm bắt 25-hydroxyvitamin D3 và D2.Xét nghiệm được thiết kế để đo định lượng tổng lượng vitamin D 25-OH trong huyết thanh và huyết tương của con người để hỗ trợ đánh giá vitaminD đủ.

Nguyên tắc

Bộ thử nghiệm định lượng vitamin D 25-OH dựa trên phân tích miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme ở pha rắn.Hệ thống phân tích sử dụng một kháng thể cho pha rắn (các giếng microtiter) và một kháng thể đơn clonal khác trong các dung dịch- Vật kháng thể thứ ba nhận ra vật kháng thể thứ hai kết hợp với enzyme (peroxidase cải tây).tiêu chuẩn và mẫu xét nghiệm (siêm) được thêm vào các giếng microtiter phủ kháng thể vitamin D 25-OH, ủ 30 phút cùng với kháng thể thứ hai. Sau khi rửa, kháng thể thứ ba được gắn nhãn với peroxidase cải xoăn (đối hợp) được thêm vào. Nếu vitamin D 25-OH của con người có trong mẫu,nó sẽ kết hợp với kháng thể trên giếng và kết hợp enzyme dẫn đến hình thành bánh sandwich giữa giai đoạn rắn và kháng thể liên kết với enzyme.các giếng được rửa bằng nước để loại bỏ các kháng thể được dán nhãn không liên kết. Một dung dịch TMB được thêm vào và ủ trong 20 phút, dẫn đến sự phát triển của một màu xanh. Sự phát triển màu được dừng lại với việc thêm dung dịch dừng.Màu được thay đổi thành màu vàng và đo quang phổ ở 450 nmNồng độ vitamin D là tỷ lệ trực tiếp với cường độ màu sắc của mẫu xét nghiệm.

Các loại thuốc

1Để tất cả các mẫu và chất phản ứng đạt nhiệt độ phòng (~ 25 °C) và trộn kỹ bằng cách đảo ngược nhẹ trước khi sử dụng.

2Chuẩn bị bộ đệm rửa bằng cách pha loãng Wash Concentrate 20 lần với nước phi ion hóa.

Cảnh báo cho người sử dụng

1. xử lý nên loại bỏ bất kỳ pipetting bằng miệng. chỉ sử dụng pipette với đầu dùng một lần cho mỗi mẫu.

2Không pha trộn vật liệu từ các lô chủ khác nhau. Đừng sử dụng các thành phần của bộ dụng cụ sau ngày hết hạn.

3Tất cả các vật liệu nên được đưa đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.