Bộ thử nghiệm ELISA kháng thể (IgE)

Ứng dụng dự định

  Bộ dụng cụ này là một phát hiện định lượng của tổng kháng thể IgE (IgE) trong huyết thanh / huyết tương của con người in vitro. Kết quả này có thể hỗ trợ chẩn đoán dị ứng loại I. Hơn nữa,xét nghiệm IgE tổng thể cũng có thể được khuyến cáo cho bệnh nhân bị nghi ngờ bệnh ký sinh trùng.

Nguyên tắc của thử nghiệm

  Hiếu nhạy ngay lập tức ( dị ứng loại I) được điều phối bởi IgE cụ thể. nồng độ IgE trong huyết thanh bình thường đạt đỉnh từ 6 đến 15 tuổi.sự gia tăng IgE cụ thể ở bệnh nhân đi kèm với sự gia tăng tổng số IgETrong trường hợp này, tiêu chuẩn có thể tăng lên đến 1.000 lần. Nói chung, các đơn vị quốc tế mỗi mililiter (IU / mL) được định nghĩa là: 1 IU / mL bằng 2,4 ng IgE. Ở bệnh nhân viêm da dị ứng di truyền,Mức IgE có thể lên tới 50Các kết quả xét nghiệm cao hơn bình thường cũng nên tính đến tác động của các bệnh tự miễn được xác nhận.

Chất phản ứng không được khuyến cáo cho kiểm tra thể chất của người khỏe mạnh, chỉ xét nghiệm kết quả dương tính hoặc âm tính thay cho kết quả xét nghiệm kháng thể IgE tương ứng dương tính hoặc âm tính,sự tương quan không chắc chắn với bệnh nhân là bệnh và có thể không phải là chỉ số duy nhất của đánh giá bệnh nhân, phải được kết hợp với trình bày lâm sàng của bệnh nhân và các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm khác để phân tích bệnh tích hợp.

Phương pháp phát hiện của bộ dụng cụ này là xét nghiệm miễn dịch liên quan đến enzyme.Các kháng thể đơn clonal nhận ra kháng IgE đã được phủ trước trong các hố của vi mạch, và mẫu huyết thanh / huyết tương của con người và một kháng thể đơn bào khác được dán nhãn bằng enzyme vào lỗ chân lông của tấm. Sau khi ủ và rửa, dung dịch chất nền được thêm vào.Giá trị OD được đọc và nội dung của nó được tính bằng máy đọc viền.

Phương pháp thử nghiệm

1.Tất cả các chất phản ứng nên được để ở nhiệt độ phòng trong 15 phút trước khi sử dụng.

2Loãng bơm đệm rửa với tốc độ loãng 1:40 với nước cất trước khi sử dụng.

3Các mẫu phải tương ứng với số lượng của tấm vi, mỗi tấm nên được cung cấp với các giếng tham chiếu (số giếng được xác định bởi tham chiếu và mẫu được kiểm tra).

Lưu ý: Sử dụng đầu ống xử lý riêng biệt cho mỗi mẫu, mỗi tham chiếu để tránh nhiễm trùng chéo.

4Thêm 100μL chất pha loãng mẫu vào giếng tương ứng, thêm 20μL mỗi mẫu tham chiếu S0, S1, S2, S3, S4, S5 và mẫu tương ứng vào giếng tương ứng.

5. lắc nhẹ để trộn. ủ ở 37 °C trong 30 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.

6. Vào cuối chu kỳ ủ, tháo và vứt vứt nắp đĩa. Tháo ra, thêm đệm rửa vào mỗi giếng trong 10 giây. Lặp lại 5 lần. Sau chu kỳ rửa cuối cùng,Chuyển tấm lên giấy bôi hoặc khăn lau sạch, và nhấn nó để loại bỏ bất kỳ dư thừa.

7. tương ứng thêm Conjugate 100μL. ủ ở 37 °C trong 30 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.

8Rửa đĩa như bước 6.

9Thêm chất nền A (50μL) và chất nền B (50μL). lắc nhẹ để trộn. ủ ở 37 °C trong 10 phút với màng tấm niêm phong niêm phong tấm.

10Thêm 50μL dung dịch dừng vào mỗi giếng. trộn nhẹ bằng cách lắc, đọc độ hấp thụ trong vòng 10 phút sau khi ngừng phản ứng.Sau đó đọc giá trị hấp thụ ở 450nm / 630nm bằng máy đọc viền- Tính toán nồng độ và đánh giá kết quả.