Human Irisin ELISA TEST KIT

Ứng dụng dự định

Bộ dụng cụ này cho phép xác định nồng độ Irisin trong huyết thanh, huyết tương và các chất lỏng sinh học khác của con người.

Quy trình kiểm tra

1- Loãng và thêm mẫu: Loãng mật độ ban đầu Tiêu chuẩn như bảng sau:

2. thêm mẫu: Thiết lập các giếng trống riêng biệt (giếng so sánh trống không thêm mẫu và phản ứng HRP-Conjugate, khác mỗi bước hoạt động là giống nhau). thử nghiệm mẫu giếng.Thêm 50μl tiêu chuẩn vào Microelisa stripplate, thêm mẫu pha loãng 40μl vào giếng mẫu thử nghiệm, sau đó thêm mẫu thử nghiệm 10μl (số mẫu pha loãng cuối cùng là 5 lần), thêm mẫu vào giếng, không chạm vào tường giếng càng xa càng tốt, và trộn nhẹ nhàng.

3ủ: Sau khi đóng tấm bằng màng tấm đóng, ủ trong 30 phút ở 37 °C.

4Thiết lập chất lỏng: dung dịch rửa 30 lần (hoặc 20 lần) pha loãng 30 lần (hoặc 20 lần) với nước cất và dự trữ.

5. Rửa:Mở ra màng tấm đóng, vứt chất lỏng, khô bằng cách lắc, thêm bơm đệm rửa vào mỗi giếng, vẫn còn trong 30s sau đó thoát nước, lặp lại 5 lần, khô bằng cách vỗ.

6Thêm enzyme: Thêm phản ứng HRP-Conjugate 50μl vào mỗi giếng, ngoại trừ giếng trống.

7.mở lò: Hoạt động với 3.

8. rửa: Hoạt động với 5.

9Màu sắc: Thêm Chromogen Solution A 50ul và Chromogen Solution B 50ul vào mỗi giếng, tránh bảo quản ánh sáng trong 10 phút ở 37 °C

10. Ngừng phản ứng: Thêm giải pháp dừng50μl vào mỗi giếng, Ngừng phản ứng ((màu xanh thay đổi sang màu vàng).

11. kiểm tra: lấy giếng trống bằng không, đọc độ hấp thụ ở 450nm sau khi thêm dung dịch dừng và trong vòng 15 phút.

Yêu cầu về mẫu

1. chiết xuất càng sớm càng tốt sau khi thu thập mẫu vật và theo các tài liệu có liên quan, và nên được thử nghiệm càng sớm càng tốt sau khi chiết xuất.mẫu có thể được giữ ở -20 °C để bảo quảnTránh lặp lại chu kỳ đông-nước.

2Không thể phát hiện mẫu có chứa NaN3, bởi vì NaN3 ức chế HRP hoạt động.

3. chiết xuất càng sớm càng tốt sau khi thu thập mẫu vật và theo các tài liệu có liên quan, và nên được thử nghiệm càng sớm càng tốt sau khi chiết xuất.mẫu có thể được giữ ở -20 °C để bảo quảnTránh lặp lại chu kỳ đông-nước.

4Không thể phát hiện mẫu có chứa NaN3, bởi vì NaN3 ức chế HRP hoạt động.

Lưu ý quan trọng

• Bộ dụng cụ được lấy ra khỏi môi trường lạnh nên được cân bằng trong 15-30 phút ở nhiệt độ phòng, các tấm ELISA được phủ nếu không sử dụng sau khi mở.đĩa nên được lưu trữ trong túi kín.
• rửa đệm sẽ phân tách tinh thể, nó có thể được làm nóng nước giúp hòa tan khi pha loãng. rửa không ảnh hưởng đến kết quả.
• Thêm mẫu với máy lấy mẫu Mỗi bước, Và kiểm tra chính xác của nó thường xuyên, tránh lỗi thí nghiệm. thêm mẫu trong vòng 5 phút, nếu số lượng mẫu là nhiều, khuyên bạn nên sử dụng Volley.
• Nếu hàm lượng vật liệu thử nghiệm quá cao (OD mẫu lớn hơn giếng tiêu chuẩn đầu tiên ),vui lòng pha loãng mẫu (n lần),Vui lòng pha loãng và nhân với hệ số pha loãng.(×n×5).
• Lớp niêm phong chỉ giới hạn việc sử dụng một lần, để tránh nhiễm trùng chéo.
• Các chất nền trốn tránh sự bảo quản ánh sáng.
• Vui lòng theo hướng dẫn sử dụng nghiêm ngặt, Việc xác định kết quả thử nghiệm phải lấy máy đọc đĩa microtiter như một tiêu chuẩn.
• Tất cả các mẫu, đệm giặt và mỗi loại chất thải nên theo quy trình vật liệu nhiễm trùng.
• Không pha trộn các chất phản ứng với các chất từ các lô khác.