Bộ dụng cụ Alpha Elisa

Bộ kit ELISA yếu tố hoại tử khối u α ở chuột, Cachectin, TNF, TNFSF2, Bộ kit ELISA TNF-α

Bộ kit Elisa Alpha Yếu tố Hoại tử Khối u ở Chuột Dành Cho Tnf Alpha 48 Giếng

Vật liệu được cung cấp cùng với bộ kit

Nguyên tắc

Bộ kit ELISA này sử dụng Sandwich-ELISA làm phương pháp. Tấm vi ELISA được cung cấp trong bộ kit này đã được phủ trước bằng một kháng thể đặc hiệu với TNF-α . Tiêu chuẩn hoặc mẫu được thêm vào các giếng tấm vi ELISA thích hợp và kết hợp với kháng thể đặc hiệu. Sau đó, một kháng thể liên hợp Peroxidase Horseradish (HRP) đặc hiệu với TNF-α được thêm vào mỗi giếng tấm vi ELISA và ủ. Các thành phần tự do được rửa trôi. Dung dịch cơ chất TMB được thêm vào mỗi giếng. Chỉ những giếng có chứa TNF-α và kháng thể thrombomodulin liên hợp HRP sẽ có màu xanh lam và sau đó chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng. Mật độ quang học (OD) được đo bằng phương pháp trắc quang ở bước sóng 450 nm. Giá trị OD tỷ lệ với nồng độ của TNF-α. Bạn có thể tính toán nồng độ của TNF-α trong các mẫu bằng cách so sánh OD của các mẫu với đường chuẩn.

Ghi chú:

• Bảo quản bộ kit ở 4°C khi nhận được. Bộ kit nên được cân bằng với nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm. Loại bỏ bất kỳ dải không cần thiết nào khỏi tấm phủ kháng thể TNF-α, niêm phong lại trong lá zip-lock và giữ ở 4°C.
• Kết tủa có thể xuất hiện trong dung dịch đệm rửa đậm đặc. Vui lòng đun nóng dung dịch đệm để hòa tan tất cả các kết tủa, điều này sẽ không ảnh hưởng đến kết quả.
• Pipet chính xác nên được sử dụng để tránh sai sót trong thí nghiệm. Mẫu nên được thêm vào Microplate trong vòng chưa đầy 5 phút. Nếu bao gồm một số lượng lớn mẫu, nên sử dụng pipet nhiều kênh.
• Đường chuẩn nên được bao gồm trong mọi xét nghiệm. Nên sử dụng các giếng lặp lại. Nếu giá trị OD của mẫu lớn hơn giếng đầu tiên của tiêu chuẩn, vui lòng pha loãng mẫu (n lần) trước khi xét nghiệm. Khi tính toán nồng độ thrombomodulin ban đầu, vui lòng nhân với hệ số pha loãng tổng (XnX5).
• Để tránh nhiễm chéo, chất bịt kín Microplate chỉ được sử dụng một lần.
• Vui lòng để Cơ chất tránh ánh sáng.
• Tất cả các thao tác phải tuân thủ nghiêm ngặt các hướng dẫn của nhà sản xuất. Kết quả được xác định bởi Máy đọc tấm vi mô.
• Tất cả các mẫu, dung dịch đệm rửa và chất thải nên được xử lý như các tác nhân gây bệnh.
• Không nên trộn các thuốc thử từ các lô khác nhau.

Nồng độ đã biết của Tiêu chuẩn TNF-a và OD đọc tương ứng của nó được vẽ trên thang log (trục x) và thang log (trục y) tương ứng. Nồng độ TNF-a trong mẫu được xác định bằng cách vẽ O.D. của mẫu trên trục Y. Nồng độ ban đầu được tính bằng cách nhân với hệ số pha loãng.