• Chuẩn bị chất phản ứng: Loãng 1 khối lượng chất đệm giặt tập trung (20 ×) với 19 khối lượng nước cất, trộn tốt.
• Thêm mẫu: Mở túi nhựa và tháo Microplate. Thiết lập 1 giếng như Blank, 2 giếng như kiểm soát âm, 2 giếng như kiểm soát tích cực. Sau khi phân phối 50μL chất pha trộn mẫu,Phân phối 50μL mẫu hoặc kiểm soát âm hoặc kiểm soát dương vào các giếng tương ứngNhẹ nhàng rung đĩa.
• Ống ủ: Ống ủ bằng vỏ đĩa và ủ micro đĩa phủ trong bồn tắm nước điều khiển nhiệt độ hoặc ủ micro đĩa ở 37 °C trong 60 phút.
• Rửa đĩa: Tháo nắp đĩa ra. Hít nội dung của tất cả các giếng. Lấp đầy các giếng với bộ đệm giặt đã pha loãng (10 ~ 20 giây để ngâm) sau đó hít lại.Lặp lại quy trình 5 lầnĐảm bảo rằng khối lượng nghỉ ngơi là tối thiểu, bằng cách nhấn đĩa trên giấy hấp thụ.
• Thêm kết hợp: Thêm 100μL kết hợp vào mỗi giếng (ngoại trừ giếng trống).
• Ống ủ: Ống ủ ở nhiệt độ 37°C trong 30 phút.
• Rửa đĩa: Lặp lại quy trình rửa như ở bước 4.
• Thêm chất nền: Thêm 50μL dung dịch chất nền A và 50μL dung dịch chất nền B vào mỗi giếng, trộn tốt.
• Phản ứng dừng: Thêm 50μL dung dịch dừng vào mỗi giếng, trộn kỹ.
• Đọc độ hấp thụ ở 450 nm. Nếu sử dụng phép đo hai bước sóng, bước sóng tham chiếu nên được chọn từ 620nm đến 690nm.

Các biện pháp phòng ngừa

• Cho phép tất cả các thành phần của bộ dụng cụ đạt nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
• Thực hiện theo hướng dẫn để kiểm soát nhiệt độ phản ứng và thời gian nghiêm ngặt.
• Không trộn các thành phần có số lô khác nhau để sử dụng.
• Không sử dụng các thành phần của bộ dụng cụ sau ngày hết hạn.