Bộ kit RUO HBsAg Elisa

Phân tích miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme để phát hiện HBsAgtrong huyết thanh hoặc huyết tương

HBsAg EIA là một xét nghiệm miễn dịch đồng thời sandwich pha rắn, sử dụng kháng thể đơn clonal và kháng thể đa clonal đặc trưng cho HBsAg.Microtiter cũng được phủ với kháng thể đơn clonal đặc trưng cho HBsAgMột mẫu huyết thanh được thêm vào các hố Microtiter có lớp kháng thể cùng với các kháng thể polyclonal kết hợp bằng enzyme. HBsAg, nếu có, sẽ tạo thành một phức hợp kháng thể-HBsAg- kháng thể-enzyme.Bảng sau đó được rửa để loại bỏ vật liệu không gắnCuối cùng, một dung dịch chất nền được thêm vào các giếng và ủ. Một màu xanh sẽ phát triển theo tỷ lệ với lượng HBsAg có trong mẫu. The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen...

Vật liệu đi kèm với bộ:

Phương pháp thử nghiệm:

Nên phân tích mỗi mẫu và đối chứng một lần và tất cả các chất phản ứng phải cân bằng ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.

1. Phân phối một giọt (50μl) của kiểm soát tích cực cũng như kiểm soát tiêu cực trong hai lần vào các giếng tương ứng.và 50ul các mẫu huyết thanh hoặc huyết tương vào các giếng thử tương ứng.
2. Thêm một giọt (50μl) Enzyme Conjugate vào mỗi giếng. trộn nhẹ nhàng bằng cách xoay đĩa microtiter trên băng ghế phẳng trong 1 phút.Không thêm Enzyme Conjugate vào giếng trống.
3. Đặt các tấm microtiter vào hộp ẩm và ủ ở 37 °C trong 30 phút.
4. Rửa từng giếng 5 lần bằng cách lấp đầy mỗi giếng với chất đệm rửa đã pha loãng, sau đó đảo ngược đĩa mạnh mẽ để lấy hết nước ra và chặn cạnh giếng trên giấy hấp thụ trong vài giây.
5. Thêm một giọt (50μl) dung dịch chất nền A (HRP-substrate) vào mỗi giếng, sau đó thêm một giọt (50μl) dung dịch chất nền B (TMB) vào mỗi giếng. trộn nhẹ nhàng và ủ ở 37 °C trong 15 phút.
6. Thêm 1 giọt (50μl) dung dịch dừng vào mỗi giếng để ngăn chặn phản ứng màu. Đọc giá trị OD ở 450 nm/630 nm với máy đọc tấm lọc kép.Có tùy chọn để đọc giá trị OD ở 450 nm với máy đọc đĩa lọc duy nhất. (sử dụng giá trị OD của giếng trống để điều chỉnh tất cả các bài đọc OD từ tất cả các giếng)