Bộ phận phụ của bộ tiếp nhận Interleukin-2 Chuột Alpha IL2R CD25 IL2-RA Bộ ELISA

Chuột tiểu đơn vị thụ thể Interleukin-2 alpha;IL2R;CD25; Bộ ELISA IL2-RA

Vật liệu được cung cấp kèm theo bộ

Yêu cầu về mẫu

• huyết thanh-đông tụ ở nhiệt độ phòng 10-20 phút, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút, loại bỏ phần nổi phía trên, Nếu xuất hiện kết tủa, Ly tâm lại.
• huyết tương-Sử dụng EDTA hoặc huyết tương citrat thích hợp làm chất chống đông máu, trộn 10-20 phút, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút, loại bỏ phần nổi phía trên, Nếu xuất hiện kết tủa, ly tâm lại.
• Nước tiểu- Thu gom vật liệu vô trùng, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút, loại bỏ phần nổi phía trên, Nếu xuất hiện kết tủa, Ly tâm lại.Hoạt động của Hydrothorax và dịch não tủy Tham khảo nó.
• nuôi cấy tế bào nổi trên bề mặt- Phát hiện các thành phần bài tiết, thu gom kiện vào một thùng chứa vô trùng, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút, loại bỏ phần nổi phía trên, phát hiện thành phần của tế bào, Pha huyền phù tế bào với PBS (PH7,2-7,4), nồng độ tế bào đạt 1 triệu / ml, chu kỳ đông lạnh-tan băng lặp đi lặp lại, làm tổn thương tế bào và giải phóng các thành phần trong tế bào, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút, loại bỏ phần nổi phía trên, Nếu xuất hiện kết tủa, ly tâm lại.
• Mẫu mô- Sau khi cắt mẫu, kiểm tra trọng lượng, bổ sung PBS (PH7.2-7.4), Làm đông nhanh bằng nitơ lỏng, duy trì mẫu ở 2-8 ℃ sau khi nấu chảy, thêm PBS (PH7.4), Đồng nhất bằng tay hoặc máy mài, ly tâm 20 phút ở tốc độ 2000-3000 vòng / phút loại bỏ phần nổi phía trên.
• chiết càng sớm càng tốt sau khi lấy mẫu, và theo các tài liệu liên quan, và phải tiến hành thí nghiệm càng sớm càng tốt sau khi chiết.Nếu không thể, mẫu có thể được giữ trong -20 ℃ để bảo quản, Tránh lặp lại các chu kỳ đông lạnh-rã đông.
• Không thể phát hiện mẫu có chứa NaN3, vì NaN3 ức chế hoạt động của HRP.

Nguyên tắc

Bộ ELISA này sử dụng Sandwich-ELISA làm phương pháp.Microelisa stripplate được cung cấp trong bộ dụng cụ này đã được phủ sẵn một loại kháng thể đặc hiệu choIL2R.Các chất chuẩn hoặc mẫu được thêm vào các giếng Microelisa stripplate thích hợp và kết hợp với kháng thể cụ thể.Sau đó là Horseradish Peroxidase (HRP) - kháng thể liên hợp đặc hiệu choIL2Rđược thêm vào từng dải Microelisa tốt và được ủ.Các thành phần tự do bị rửa trôi.Dung dịch chất nền TMB được thêm vào mỗi giếng.Chỉ những giếng có chứaIL2Rvà kháng thể thrombomodulin liên hợp HRP sẽ có màu xanh lam và sau đó chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng.Mật độ quang học (OD) được đo bằng phương pháp quang phổ ở bước sóng 450 nm.Giá trị OD tỷ lệ với nồng độ củaIL2R.Bạn có thể tính toán nồng độ củaIL2Rtrong các mẫu bằng cách so sánh OD của các mẫu với đường chuẩn.

Ghi chú:

• Bảo quản bộ dụng cụ ở 4 ° C sau khi nhận. Bộ dụng cụ phải được cân bằng với nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.Lấy bất kỳ dải nào không cần thiết ra khỏi đĩa Tráng kháng thể IL2R, đậy chúng lại trong giấy bạc có khóa zip và giữ ở 4 ° C.
• Kết tủa có thể xuất hiện trong dung dịch đệm giặt đậm đặc.Hãy đun nóng dung dịch đệm để hòa tan hết kết tủa, điều này sẽ không ảnh hưởng đến kết quả.
• Nên sử dụng pipet chính xác để tránh sai số thí nghiệm.Các mẫu phải được thêm vào Microplate trong vòng chưa đầy 5 phút.Nếu một số lượng lớn mẫu được bao gồm, nên dùng pipet nhiều kênh.
• Đường cong chuẩn phải được bao gồm trong mọi thử nghiệm.Nhân rộng các giếng được khuyến khích.Nếu giá trị OD của mẫu lớn hơn giếng đầu tiên của chất chuẩn, vui lòng pha loãng mẫu (n lần) trước khi thử nghiệm.Khi tính toán nồng độ thrombomodulin ban đầu, vui lòng nhân với tổng hệ số pha loãng (XnX5).
• Để tránh lây nhiễm chéo, chất bịt kín Microplate chỉ sử dụng một lần.
• Vui lòng giữ Chất nền tránh xa ánh sáng.
• Tất cả các hoạt động phải tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn của nhà sản xuất.Kết quả được xác định bởi Microtiter Plate Reader.
• Tất cả các mẫu, đệm giặt và chất thải phải được coi là tác nhân lây nhiễm.
• Thuốc thử từ các lô khác nhau không được trộn lẫn.