BIOVANTION Bộ xét nghiệm kháng thể kháng Thyroglobulin Anti Tg Ab

KIT KIỂM TRA ELISA Anti-Tg Thyroglobulin Ab

1. Mục đích sử dụng

Xét nghiệm miễn dịch để xác định định lượng trong ống nghiệm các kháng thể kháng thyroglobulin trong huyết thanh người.Việc xác định kháng Tg được sử dụng để hỗ trợ phát hiện các bệnh tuyến giáp tự miễn.

2. Tóm tắt

Thyroglobulin (Tg) được sản xuất trong tuyến giáp và là thành phần chính trong lòng của nang giáp.Khi phối hợp với enzyme peroxidase đặc hiệu tuyến giáp (TPO), Tg có chức năng thiết yếu trong việc tạo i-ốt của L-tyrosine và trong việc hình thành các hormone tuyến giáp T4 và T3.Cả Tg và TPO đều có khả năng tự gây dị ứng.

Nồng độ cao trong huyết thanh của các kháng thể chống lại Tg (tự kháng thể Tg) được tìm thấy ở những đối tượng bị viêm tuyến giáp dựa trên tự miễn dịch.Nồng độ cao của anti-Tg cùng với anti-TPO là dấu hiệu của viêm tuyến giáp thâm nhiễm lymphocytic mãn tính (bệnh Hashimoto).Tần suất kháng thể thyroglobulin là khoảng 70-80% ở những đối tượng bị viêm tuyến giáp tự miễn, bao gồm cả bệnh Hashimoto và khoảng 30% ở những người bị bệnh Graves. để chẩn đoán phân biệt (các trường hợp nghi ngờ viêm tuyến giáp tự miễn không rõ nguyên nhân với kết quả xét nghiệm kháng TPO âm tính, bệnh Graves không thâm nhiễm tế bào lympho và để loại trừ sự can thiệp của tự kháng thể Tg trong xét nghiệm Tg).

Mặc dù độ nhạy của quy trình có thể tăng lên bằng cách xác định đồng thời các kháng thể tuyến giáp bổ sung (kháng thể kháng TPO, kháng thể thụ thể TSH), kết quả âm tính không loại trừ chắc chắn sự hiện diện của bệnh tự miễn.Mức độ của hiệu giá kháng thể không tương quan với hoạt động lâm sàng của bệnh.Các tiêu đề ban đầu được nâng cao có thể trở nên tiêu cực nếu bệnh vẫn tồn tại trong một thời gian dài hơn hoặc nếu

thuyên giảm xảy ra.Nếu kháng thể xuất hiện trở lại sau khi thuyên giảm, có khả năng tái phát.

Các xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với Enzyme sử dụng kháng nguyên của người và kháng thể IgG chống người của thỏ (anti-IgG).

3. vật liệu nghiên cứu cung cấp

• Microplate tráng, 8 x 12 dải, 96 giếng.Được phủ sẵn kháng nguyên TG của người.

• Dụng cụ hiệu chuẩn, 6 lọ, mỗi lọ 1 mL, sẵn sàng sử dụng;Nồng độ: 0 (A), 50 (B), 150 (C), 500 (D), 1000 (E) và 2000 (F) IU / mL.

• Enzyme Conjugate, 1 lọ, 11,0 mL HRP (peroxidase từ cải ngựa) đánh dấu kháng thể IgG kháng IgG của thỏ (anti-IgG) trong đệm Tris-NaCl có chứa BSA (albumin huyết thanh bò).Chứa 0,1% chất bảo quản ProClin300.

• Chất pha loãng huyết thanh: 1 lọ, 11mL.Chứa muối đệm và thuốc nhuộm

• Dung dịch rửa Cô đặc, 1 lọ, 25 ml (đậm đặc 40 lần), dung dịch rửa PBS-Tween.

• Chất nền, 1 lọ, 11ml, sẵn sàng sử dụng, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Dung dịch Dừng, 1 lọ, 6,0 ml axit sulfuric 1 mol / l.

• IFU, 1 bản sao.

• Tấm Nắp: 2 miếng.

4. Vật liệu cần thiết (nhưng không được cung cấp)

• Đầu đọc Microplate với khả năng hấp thụ bước sóng 450nm và 620nm.
• Máy giặt Microplate.
• Máy ấp trứng.
• Máy lắc tấm.
• Micropipet và micipet đa kênh phân phối 50µl với độ chính xác hơn 1,5%.
• Giấy thấm.
• Nước cất

5. Quy trình kiểm tra

• Chỉ sử dụng số lượng giếng được yêu cầu và định dạng các giếng vi tấm cho mỗi mẫu hiệu chuẩn và mẫu cần thử nghiệm.

• Thêm 100 µL chất hiệu chuẩn vào mỗi giếng.

• Thêm 100 µL Chất pha loãng Mẫu (Màu xanh lục) vào mỗi giếng Ngoại trừ các giếng Hiệu chuẩn.

• Thêm 10 µL Mẫu vào mỗi giếng Dịch pha loãng Mẫu (LƯU Ý: Thuốc thử trong Giếng sẽ chuyển từ màu Xanh lam từ Xanh lục), sau đó lắc 30 giây.

• Đậy nắp đĩa lại và ủ ở 37oC trong 30 phút.

• Loại bỏ các thành phần bên trong đĩa vi mô bằng cách gạn hoặc hút.Nếu gạn, hãy dùng giấy thấm để thấm khô đĩa.

• Thêm 350 µL dung dịch rửa, gạn (gõ nhẹ và thấm) hoặc hút.Lặp lại 4 lần bổ sung cho tổng số 5 lần giặt.Khi kết thúc quá trình rửa, lật ngược đĩa và đổ hết dung dịch rửa còn sót lại lên giấy thấm.

• Thêm 100 µL liên hợp enzyme,

• Đậy nắp đĩa lại và ủ ở 37 ° C trong 30 phút

• Thêm 350 µL dung dịch rửa, gạn (gõ nhẹ và thấm) hoặc hút.Lặp lại 4 lần bổ sung cho tổng số 5 lần giặt.Khi kết thúc quá trình rửa, lật ngược đĩa và đổ hết dung dịch rửa còn sót lại lên giấy thấm.

• Thêm 100 µL chất nền vào mỗi giếng.Đậy nắp và ủ ở nhiệt độ môi trường (18-25 ℃) trong bóng tối để phản ứng trong 10 phút.Không lắc đĩa sau khi thêm chất nền.

• Thêm 50 µL dung dịch dừng vào mỗi giếng.

• Lắc trong 15-20 giây để trộn chất lỏng trong giếng.Điều quan trọng là phải đảm bảo rằng màu xanh lam chuyển thành màu vàng hoàn toàn.

• Đọc độ hấp thụ của mỗi giếng ở bước sóng 450 nm (sử dụng 620 đến 630 nm làm bước sóng chuẩn để giảm thiểu sự không hoàn hảo của giếng) trong máy đọc đĩa vi mô.Kết quả phải được đọc trong vòng 30 phút sau khi thêm dung dịch dừng.