|
Thông tin chi tiết sản phẩm:
|
| Mục đích: | CHỈ sử dụng cho nghiên cứu | Kho: | 2-8 ℃ |
|---|---|---|---|
| Sự chỉ rõ: | 48well / 96wells | Phương pháp: | Bánh mì sandwich |
| Cat. Con mèo. No. Không.: | In-Mo1153 | CV (%): | SD / meanX100 |
| Làm nổi bật: | Bộ dụng cụ E Cadherin Elisa,Bộ dụng cụ dành cho chuột E Cad Elisa,Bộ dụng cụ nghiên cứu E Cadherin Elisa |
||
Chuột E-Cadherin, Bộ ELISA E-Cad
Bộ ELISA này sử dụng Sandwich-ELISA làm phương pháp.Dải Microelisa được cung cấp trong bộ dụng cụ này đã được phủ sẵn một loại kháng thể đặc hiệu cho E-Cad.Các chất chuẩn hoặc mẫu được thêm vào các giếng Microelisa stripplate thích hợp và kết hợp với kháng thể cụ thể.Sau đó, một kháng thể liên hợp Horseradish Peroxidase (HRP) đặc hiệu cho E-Cad được thêm vào mỗi dải Microelisa và ủ.Các thành phần tự do bị rửa trôi.Dung dịch chất nền TMB được thêm vào mỗi giếng.Chỉ những giếng có chứa kháng thể E-Cad liên hợp với E-Cad và HRP mới có màu xanh lam và sau đó chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng.Mật độ quang học (OD) được đo bằng phương pháp quang phổ ở bước sóng 450 nm.Giá trị OD tỷ lệ với nồng độ E-Cad.Bạn có thể tính toán nồng độ E-Cad trong các mẫu bằng cách so sánh OD của các mẫu với đường chuẩn.
Vật liệu được cung cấp kèm theo bộ
| Vật liệu được cung cấp kèm theo bộ | 48 lần xác định | 96 phép xác định | Kho | |
| 1 | Hướng dẫn sử dụng | 1 | 1 | RT |
| 2 | Màng tấm đóng | 2 | 2 | RT |
| 3 | Túi kín | 1 | 1 | RT |
| 4 | Microelisa sọc | 1 | 1 | 2-8 ℃ |
| 5 | Tiêu chuẩn: 108pg / ml | 0,5ml × 1 chai | 0,5ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 6 | Chất pha loãng tiêu chuẩn | 1,5ml × 1 chai | 1,5ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 7 | Thuốc thử HRP-Conjugate | 3ml × 1 chai | 6ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| số 8 | Chất pha loãng mẫu | 3ml × 1 chai | 6ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 9 | Giải pháp Chromogen A | 3ml × 1 chai | 6ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 10 | Giải pháp Chromogen B | 3ml × 1 chai | 6ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 11 | Giải pháp dừng | 3ml × 1 chai | 6ml × 1 chai | 2-8 ℃ |
| 12 | Dung dịch rửa | 20ml (20X) × 1 chai | 20ml (30X) × 1 chai | 2-8 ℃ |
Thủ tục
Pha loãng các chất chuẩn
1.Ten giếng được thiết lập cho các tiêu chuẩn trong dải Microelisa.Trong Giếng 1 và Giếng 2, dung dịch chuẩn 100μl và dung dịch đệm pha loãng tiêu chuẩn 50μl được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 3 và Giếng 4, dung dịch 100μl từ Giếng 1 và Giếng 2 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Dung dịch 50μl được loại bỏ từ Giếng 3 và Giếng 4. Trong Giếng 5 và Giếng 6, dung dịch 50μl từ Giếng 3 và Giếng 4 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 7 và Giếng 8, dung dịch 50μl từ Giếng 5 và Giếng 6 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 9 và Giếng 10, dung dịch 50μl từ Giếng 7 và Giếng 8 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Dung dịch 50μl được loại bỏ từ Giếng 9 và Giếng 10. Sau khi pha loãng, tổng thể tích trong tất cả các giếng là 50μl và các nồng độ tương ứng là 24ng / ml, 16 ng / ml, 8 ng / ml, 4ng / ml và 2ng / ml. .
2. Trong dải Microelisa, để trống một ô trống như điều khiển trống.Trong các giếng mẫu, 40μl đệm pha loãng mẫu và 10μl mẫu được thêm vào (hệ số pha loãng là 5).Mẫu phải được chất xuống đáy mà không chạm vào thành giếng.Trộn đều với lắc nhẹ.
3. Ủ: ủ 30 phút ở 37 ℃ sau khi đậy kín bằng màng đậy nắp.
4. Pha loãng: pha loãng đệm rửa đậm đặc với nước cất (30 lần đối với 96T và 20 lần đối với 48T).
5. Rửa: cẩn thận bóc lớp màng ngăn nắp, hút và đổ đầy dung dịch rửa.Đổ bỏ dung dịch rửa sau khi để yên trong 30 giây.Lặp lại quy trình giặt trong 5 lần.
6. Thêm 50 μl thuốc thử HRP-Conjugate vào mỗi giếng ngoại trừ giếng đối chứng trắng.
7. Ủ như mô tả ở Bước 3.
8. Rửa như mô tả trong Bước 5.
9. Tạo màu: Thêm 50 μl Dung dịch Chromogen A và 50 μl Dung dịch Chromogen B vào mỗi giếng, lắc nhẹ và ủ ở 37 ℃ trong 15 phút.Vui lòng tránh ánh sáng trong quá trình tô màu.
10. Kết thúc: thêm 50 μl dung dịch dừng vào mỗi giếng để kết thúc phản ứng.Màu sắc trong giếng chuyển từ xanh lam sang vàng.
11. Đọc độ hấp thụ OD ở bước sóng 450nm bằng đầu đọc đĩa siêu nhỏ.Giá trị OD của giếng điều khiển trống được đặt bằng 0.Thử nghiệm nên được thực hiện trong vòng 15 phút sau khi thêm dung dịch dừng.
Độ chính xác
Độ chính xác trong khảo nghiệm (Độ chính xác trong một cuộc khảo nghiệm): 3 mẫu có E-Cad cấp thấp, trung bình và cao được kiểm tra lần lượt 20 lần trên một đĩa.
Inter-assay Precision (Độ chính xác giữa các lần thử nghiệm): 3 mẫu có E-Cad mức thấp, trung bình và cao được thử nghiệm trên 3 đĩa khác nhau, 8 lần lặp lại trong mỗi đĩa.
CV (%) = SD / meanX100
Thử nghiệm nội bộ: CV <10%
Thử nghiệm giữa các kỳ: CV <12%
Phạm vi khảo nghiệm
0,6pg / ml -80pg / ml
Nhạy cảm:
0,1 pg / ml
Người liên hệ: Mr. Steven
Tel: +8618600464506
