Human Thrombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Người dùng thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit để nghiên cứu sử dụng

Người dùng thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Vật liệu được cung cấp kèm theo bộ

Nguyên tắc

Bộ ELISA này sử dụng Sandwich-ELISA làm phương pháp.Microelisa stripplate được cung cấp trong bộ dụng cụ này đã được phủ sẵn một loại kháng thể đặc hiệu với thrombomodulin.Các chất chuẩn hoặc mẫu được thêm vào các giếng Microelisa stripplate thích hợp và kết hợp với kháng thể cụ thể.Sau đó, một kháng thể liên hợp Horseradish Peroxidase (HRP) đặc hiệu cho thrombomodulin được thêm vào mỗi dải Microelisa và ủ.Các thành phần tự do bị rửa trôi.Dung dịch chất nền TMB được thêm vào mỗi giếng.Chỉ những giếng có chứa thrombomodulin và kháng thể liên hợp thrombomodulin HRP mới có màu xanh lam và sau đó chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng.Mật độ quang học (OD) được đo bằng phương pháp quang phổ ở bước sóng 450 nm.Giá trị OD tỷ lệ với nồng độ của thrombomodulin.Bạn có thể tính toán nồng độ của thrombomodulin trong các mẫu bằng cách so sánh OD của các mẫu với đường chuẩn.

Chuẩn bị mẫu

1.Chuẩn bị huyết thanh

Sau khi thu thập toàn bộ máu, để cho máu đông lại bằng cách để máu không bị xáo trộn ở nhiệt độ phòng.Quá trình này thường mất 10 - 20 phút.Loại bỏ cục máu đông bằng cách ly tâm ở tốc độ 2.000-3.000 vòng / phút trong 20 phút.Nếu kết tủa xuất hiện trong quá trình bảo lưu, mẫu phải được ly tâm lại.

2.Chuẩn bị huyết tương

Thu toàn bộ máu vào các ống có chất chống đông máu (EDTA hoặc citrate).Sau khi ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 - 20 phút, các ống được ly tâm trong 20 phút với tốc độ 2.000 - 3.000 vòng / phút.Thu thập cẩn thận phần nổi phía trên làm mẫu huyết tương.Nếu kết tủa xuất hiện trong quá trình bảo lưu, mẫu phải được ly tâm lại.

3.Mẫu nước tiểu

Thu thập nước tiểu vào các ống vô trùng.Thu thập cẩn thận phần nổi phía trên sau khi ly tâm 20 phút ở tốc độ 2.000-3.000 vòng / phút.Nếu kết tủa xuất hiện trong quá trình bảo lưu, mẫu phải được ly tâm lại.Quy trình chuẩn bị dịch não tủy và dịch màng phổi cũng giống như quy trình lấy mẫu nước tiểu.

4.Mẫu tế bào

Nếu muốn phát hiện chất tiết của tế bào, thu dịch nổi phía trên vào ống vô trùng.Thu thập cẩn thận phần nổi phía trên sau khi ly tâm 20 phút ở tốc độ 2.000-3.000 vòng / phút.Nếu bạn muốn phát hiện các thành phần nội bào, hãy pha loãng tế bào thành 1X10⁶/ ml với PBS (pH 7,2-7,4).Các tế bào bị phá hủy để giải phóng các thành phần nội bào bằng cách đông lạnh và rã đông lặp đi lặp lại.Thu thập cẩn thận phần nổi phía trên sau khi ly tâm 20 phút ở tốc độ 2.000-3.000 vòng / phút.Nếu kết tủa xuất hiện trong quá trình bảo lưu, mẫu phải được ly tâm lại.

5.Mẫu mô

Các mẫu mô được cắt, cân, đông lạnh trong nitơ lỏng và bảo quản ở -80 ℃ để sử dụng trong tương lai.Các mẫu mô được đồng nhất sau khi thêm PBS (pH 7,4).Các mẫu phải được vận hành ở 4 ℃.Thu thập cẩn thận phần nổi phía trên sau khi ly tâm 20 phút ở tốc độ 2.000-3.000 vòng / phút.Loại bỏ phần nổi phía trên để xét nghiệm ELISA và sử dụng trong tương lai.

Ghi chú:

• Việc chiết mẫu và xét nghiệm ELISA nên được thực hiện càng sớm càng tốt sau khi thu thập mẫu.Các mẫu phải được chiết xuất theo các tài liệu liên quan.Nếu không thể thực hiện xét nghiệm ELISA ngay lập tức, các mẫu có thể được bảo quản ở -20 ℃. Nên tránh các chu kỳ đông lạnh-rã đông lặp lại.
• Bộ dụng cụ của chúng tôi không thể được sử dụng cho các mẫu có NaN3 có thể ức chế hoạt động của HRP.