Kiểm tra ISO Thyroxine T4 Elisa Kiểm tra huyết thanh T4 miễn phí Thời gian đọc 110 phút

T4 Thyroxine
REF: DS177703 96 kiểm tra

1. Mục đích sử dụng
Xét nghiệm miễn dịch để xác định định lượng thyroxine trong huyết thanh người trong ống nghiệm.

2. Tóm tắt
Hormone thyroxine (T4) là sản phẩm chính do tuyến giáp tiết ra và là thành phần không thể thiếu của hệ thống điều hòa tuyến giáp dưới đồi-thùy trước tuyến yên.Nó có chức năng ảnh hưởng đồng hóa đến quá trình trao đổi chất.Thyroxine được hình thành trong một phản ứng ghép đôi từ hai phân tử DIT (3,5-diiodotyrosine) trong tuyến giáp.Nó được lưu trữ liên kết với thyroglobulin trong lớp vỏ của các nang tuyến giáp và được tiết ra theo yêu cầu dưới ảnh hưởng của TSH.(1, 2) Phần chính (> 99%) tổng lượng thyroxine (T4) trong huyết thanh hiện diện ở dạng liên kết với protein.Vì nồng độ của các protein vận chuyển trong huyết thanh phụ thuộc vào các tác động ngoại sinh và nội sinh, nên tình trạng của các protein liên kết cũng phải được tính đến khi đánh giá nồng độ hormone tuyến giáp trong huyết thanh.Nếu điều này bị bỏ qua, những thay đổi trong các protein liên kết (ví dụ như do các chế phẩm chứa estrogen, trong thời kỳ mang thai hoặc khi có hội chứng thận hư, v.v.) có thể dẫn đến đánh giá sai lầm về tình trạng chuyển hóa của tuyến giáp.(3, 4, 5, 6, 7) Việc xác định T4 có thể được sử dụng cho các chỉ định sau: phát hiện cường giáp, phát hiện suy giáp nguyên phát và thứ phát, và theo dõi liệu pháp ức chế TSH.(số 8)
Xét nghiệm T4 sử dụng nguyên tắc xét nghiệm cạnh tranh với kháng thể được định hướng cụ thể chống lại T4.T4 nội sinh, được giải phóng do tác dụng của axit 8-anilino-1-naphthalene sulfonic (ANS).

3. Vật liệu thử được cung cấp
• Microplate tráng, 8 x 12 dải, 96 giếng, được tráng trước bằng dẫn xuất T4.
• Dụng cụ hiệu chuẩn, 6 lọ, mỗi lọ 1 ml, sẵn sàng sử dụng;Nồng độ: 0 (A), 2,5 (B), 5 (C), 10 (D), 15 (E) và 30 (F) μg / dL.
• Enzyme Conjugate, 1 lọ, 6,0 ml HRP (peroxidase từ cải ngựa) được dán nhãn đơn dòng chuột T4 trong đệm Tris-NaCl có chứa BSA (albumin huyết thanh bò).Chứa 0,2% chất bảo quản ProClin300.ANS 1,5 mg / mL.
• Chất nền, 1 lọ, 11ml, sẵn sàng sử dụng, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Dung dịch Dừng, 1 lọ, 6,0 ml axit sulfuric 1 mol / l.
• Dung dịch rửa Cô đặc, 1 lọ, 25 ml (đậm đặc 40 lần), dung dịch rửa PBS-Tween.
• IFU, 1 bản sao.
• Tấm Nắp: 1 cái.

4. Vật liệu cần thiết (nhưng không được cung cấp)
• Đầu đọc vi sóng với khả năng hấp thụ bước sóng 450nm và 620nm.
• Máy giặt Microplate.
• Vườn ươm.
• Máy lắc tấm.
• Micropipet và microphone đa kênh phân phối 50μl với độ chính xác hơn 1,5%.
• Giấy thấm.
• Nước cất

Quy trình kiểm tra

Đảm bảo các mẫu, mẫu chuẩn và mẫu chứng của bệnh nhân ở nhiệt độ môi trường (18-25 ℃) trước khi đo.Trộn tất cả các thuốc thử bằng cách đảo nhẹ trước khi sử dụng.

• Chỉ sử dụng số lượng giếng cần thiết và định dạng các giếng của vi mẫu cho mỗi mẫu hiệu chuẩn và mẫu cần thử nghiệm.• Thêm 50 µL chất hiệu chuẩn hoặc mẫu vào mỗi giếng.

• Thêm 50 µL liên hợp enzyme vào mỗi giếng.

• Lắc nhẹ tấm vi trong 30 giây để trộn đều.

• Đậy nắp đĩa và ủ ở 37 ℃ trong 60 phút.

• Loại bỏ các thành phần bên trong đĩa vi mô bằng cách gạn hoặc hút.Nếu gạn, hãy dùng giấy thấm để thấm khô đĩa.

• Thêm 350 µl dung dịch rửa, gạn (vòi và thấm) hoặc hút.Lặp lại 4 lần bổ sung cho tổng số 5 lần giặt.Có thể sử dụng máy giặt dải vi tấm tự động.Khi kết thúc quá trình rửa, lật ngược đĩa và đổ hết dung dịch rửa còn sót lại lên giấy thấm.

• Thêm 100 µL chất nền vào mỗi giếng.

• Đậy nắp và ủ ở nhiệt độ môi trường (18-25 ℃) trong bóng tối để phản ứng trong 20 phút.Không lắc đĩa sau khi thêm chất nền.• Thêm 50 µL dung dịch dừng vào mỗi giếng.

• Lắc trong 15-20 giây để trộn chất lỏng trong giếng.Điều quan trọng là phải đảm bảo rằng màu xanh lam chuyển thành màu vàng hoàn toàn.

• Đọc độ hấp thụ của mỗi giếng ở bước sóng 450 nm (sử dụng 620 đến 630 nm làm bước sóng chuẩn để giảm thiểu sự không hoàn hảo của giếng) trong máy đọc đĩa vi mô.Kết quả sẽ được đọc trong vòng 30 phút sau khi thêm dung dịch dừng