Thử nghiệm Hormone kích thích tuyến giáp TSH ELISA Thyrotropin

Khuyến mãi hấp dẫn KIT KIỂM TRA ELISA TSH
REF: DS177701 96 kiểm tra

Mục đích sử dụng
Xét nghiệm miễn dịch để xác định định lượng trong ống nghiệm của thyrotropin trong huyết thanh người.

1. Tóm tắt

• Hormone kích thích tuyến giáp (TSH, thyrotropin) là một glycoprotein có trọng lượng phân tử khoảng.30000 dalton và bao gồm hai đơn vị con.
• Đo nồng độ trong huyết thanh thường là thyrotropin (TSH), một glycoprotein có trọng lượng phân tử là 28.000 dalton và được tiết ra từ thùy trước tuyến yên, thường được coi là chỉ số nhạy nhất hiện có để chẩn đoán suy giáp nguyên phát và thứ phát (tuyến yên) (1, 2).
• Các phép đo TSH đều hữu ích như nhau trong việc phân biệt suy giáp thứ cấp và thứ ba (vùng dưới đồi) với bệnh tuyến giáp nguyên phát.Sự giải phóng TSH từ tuyến yên được điều chỉnh bởi yếu tố giải phóng thyrotropin (TRH), được tiết ra bởi vùng dưới đồi và do tác động trực tiếp của T4 và triiodothyronine (T3), các hormone tuyến giáp, tại tuyến yên.
• Tăng mức độ T3 và T4 làm giảm phản ứng của tuyến yên đối với các tác động kích thích của TRH.Trong suy giáp thứ cấp và thứ ba, nồng độ T4 thường thấp và nồng độ TSH nói chung là thấp hoặc bình thường.Thiếu TSH tuyến yên (suy giáp thứ phát) hoặc không đủ khả năng kích thích tuyến yên bằng TRH (suy giáp cấp ba) gây ra điều này.
• Thử nghiệm kích thích TRH phân biệt các tình trạng này.Trong suy giáp thứ phát, đáp ứng TSH với TRH bị giảm đi trong khi đáp ứng bình thường hoặc chậm đạt được ở suy giáp cấp ba. Các phép đo TSH.Phương pháp này là một xét nghiệm thế hệ thứ hai, cung cấp phương tiện để phân biệt trong phạm vi cường giáp-euthyroid.(3)

2. Thuốc thử Nguyên liệu được cung cấp
• Microplate tráng, 8 x 12 dải, 96 giếng, được phủ sẵn Anti-TSH đơn dòng cho chuột.
• Dụng cụ hiệu chuẩn, 6 lọ, mỗi lọ 1 ml, sẵn sàng sử dụng;Nồng độ: 0 (A), 0,5 (B), 2 (C), 5 (D), 10 (E) và 25 (F) μIU / mL.
• Enzyme Conjugate, 1 lọ, 6,0 ml HRP (peroxidase từ cải ngựa) được dán nhãn Anti-TSH đơn dòng của chuột trong dung dịch đệm Tris-NaCl có chứa BSA (albumin huyết thanh bò).Chứa 0,1% chất bảo quản ProClin300.
• Chất nền, 1 lọ, 11ml, sẵn sàng sử dụng, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Dung dịch Dừng, 1 lọ, 6,0 ml axit sulfuric 1 mol / l.
• Dung dịch rửa Cô đặc, 1 lọ, 25 ml (đậm đặc 40 lần), dung dịch rửa PBS-Tween.
• IFU, 1 bản sao.
• Tấm Nắp: 1 cái.

Vật liệu bắt buộc (nhưng không được cung cấp)
• Đầu đọc vi sóng với khả năng hấp thụ bước sóng 450nm và 620nm.
• Máy giặt Microplate.
• Vườn ươm.
• Máy lắc tấm.
• Micropipet và microphone đa kênh phân phối 50μl với độ chính xác hơn 1,5%.
• Giấy thấm.
• Nước cất

3. Quy trình kiểm tra

Đảm bảo các mẫu, mẫu chuẩn và mẫu chứng của bệnh nhân ở nhiệt độ môi trường (18-25 ℃) trước khi đo.Trộn tất cả các thuốc thử bằng cách đảo nhẹ trước khi sử dụng.

• Chỉ sử dụng số lượng giếng cần thiết và định dạng các giếng của vi mẫu cho mỗi mẫu hiệu chuẩn và mẫu cần thử nghiệm.• Thêm 25 µL chất hiệu chuẩn hoặc mẫu vào mỗi giếng.

• Thêm 100 µL liên hợp enzyme vào mỗi giếng.

• Lắc nhẹ tấm vi trong 30 giây để trộn đều.

• Đậy nắp đĩa và ủ ở 37 ℃ trong 60 phút.

• Loại bỏ các thành phần bên trong đĩa vi mô bằng cách gạn hoặc hút.Nếu gạn, hãy dùng giấy thấm để thấm khô đĩa.

• Thêm 350 µL dung dịch rửa, gạn (vòi và thấm) hoặc hút.Lặp lại 4 lần bổ sung cho tổng số 5 lần giặt.Có thể sử dụng máy giặt dải vi tấm tự động.Khi kết thúc quá trình rửa, lật ngược đĩa và đổ hết dung dịch rửa còn sót lại lên giấy thấm.

• Thêm 100 µL chất nền vào mỗi giếng.

• Đậy nắp và ủ ở nhiệt độ môi trường (18-25 ℃) trong bóng tối để phản ứng trong 20 phút.Không lắc đĩa sau khi thêm chất nền.

• Thêm 50 µL dung dịch dừng vào mỗi giếng.

• Lắc trong 15-20 giây để trộn chất lỏng trong giếng.Điều quan trọng là phải đảm bảo rằng màu xanh lam chuyển thành màu vàng hoàn toàn.

• Đọc độ hấp thụ của mỗi giếng ở bước sóng 450 nm (sử dụng 620 đến 630 nm làm bước sóng chuẩn để giảm thiểu sự không hoàn hảo của giếng) trong máy đọc đĩa vi mô.Kết quả sẽ được đọc trong vòng 30 phút sau khi thêm dung dịch dừng