Xét nghiệm EBV-VCA IgA Ab Bộ xét nghiệm ELISA Bộ xét nghiệm xét nghiệm miễn dịch enzym Mẫu xét nghiệm huyết tương

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog Số: BE501A
Xét nghiệm miễn dịch enzyme để phát hiện kháng thể IgA đối với kháng nguyên capsid của virus (VCA) của Virus Epstein-Barr (EBV).
 
1. NGUYÊN TẮC CỦA CÂU HỎI
Bộ EBV-VCA IgA Ab ELISA sử dụng một hệ thống phát hiện trong đó các giếng vi tấm được phủ bằng kháng nguyên tái tổ hợp tương ứng với một đoạn EBV-VCA có tính kháng nguyên cao.Các mẫu huyết thanh hoặc huyết tương, mẫu chứng được thêm vào giếng.Trong thời gian ủ bệnh, các kháng thể IgA đặc hiệu cho EBV-VCA có trong bệnh phẩm sẽ liên kết với kháng nguyên tái tổ hợp được cố định trên các giếng vi tấm.Các giếng được rửa để loại bỏ các vật liệu không liên kết, và liên hợp peroxidase IgA kháng người sẽ liên kết với phức hợp kháng nguyên-kháng thể và các liên hợp enzyme không liên kết dư thừa lại được loại bỏ bằng cách rửa.Cơ chất enzyme, tetramethylbenzidine (TMB), được thêm vào khi ủ, cơ chất sẽ bị thủy phân bởi enzyme liên kết và màu xanh lam hoặc xanh lam phát triển trong các giếng chứa kháng thể EBV-VCA IgA.Phản ứng enzyme bị dừng lại bằng cách thêm axit sulfuric.Cường độ màu phát triển được đo quang phổ ở bước sóng 450nm (450 nm / 630 nm) và tỷ lệ với lượng kháng thể có trong mẫu vật.
THUỐC THỬ
 
2. Vật liệu được cung cấp với bộ dụng cụ:

 
3. THỦ TỤC TRẢ LỜI

1. Mang Bộ dụng cụ ELISA (tất cả thuốc thử) và Mẫu bệnh phẩm về nhiệt độ phòng trước khi sử dụng (khoảng 30 phút).
2. Pha loãng dung dịch đệm rửa đậm đặc 1:19 bằng ddH2O.Ví dụ, 5 ml dung dịch đệm rửa cần được pha loãng đến tổng thể tích 100 mL bằng nước đã khử ion hoặc nước cất.
3. Đối với mỗi bài kiểm tra, đặt một ô trống cũng như kiểm soát nền, hai kiểm soát tích cực và ba kiểm tra âm tính.Phân phối 100ml đối chứng dương tính và đối chứng âm tính vào các giếng riêng lẻ.Không được thêm mẫu hoặc HRP-Conjugate vào giếng trống.
4. Phân phối 100ml dung dịch pha loãng mẫu vào các giếng thử riêng lẻ ngoại trừ các giếng đối chứng.
5. Thêm 10ml mỗi mẫu thử vào các giếng thử;xoáy để trộn.
6. Ủ trong 30 phút ở 37 ° C
7. Rửa mỗi giếng 5 lần bằng cách đổ đầy đệm rửa đã pha loãng vào mỗi giếng, sau đó lật mạnh đĩa để hút hết nước ra ngoài và chặn vành giếng trên giấy thấm trong vài giây.
8. Thêm 100ml Enzyme Conjugate vào mỗi giếng.Trộn nhẹ bằng cách xoay đĩa microtiter trên mặt phẳng phẳng trong 1 phút.Không thêm Enzyme Conjugate vào giếng trống.
9. Ủ 20 phút ở 37 ° C
10. Rửa đĩa 5 lần như bước 7.
11. Thêm một giọt (50ml) Dung dịch chất nền A (HRP-chất nền) vào mỗi giếng, sau đó thêm một giọt (50ml) Dung dịch chất nền B (TMB) vào mỗi giếng.Trộn nhẹ và ủ ở 37 ° C trong 30 phút..
12. Thêm vào mỗi giếng một giọt (50ml) Dung dịch dừng để dừng phản ứng màu.Đọc giá trị OD ở bước sóng 450 nm / 630 nm bằng đầu đọc tấm lọc kép.Có tùy chọn đọc giá trị OD ở bước sóng 450 nm với đầu đọc tấm lọc đơn.(sử dụng giá trị OD của giếng trống để hiệu chỉnh tất cả số đọc OD từ tất cả các giếng)