Bộ xét nghiệm Elisa IgM 96 chiếc Plasma Bộ xét nghiệm kháng thể chẩn đoán HAV

HAV IgM Elisa Kit 96 Test / Kit

Catolog số: BE301A

1. NGUYÊN TẮC

1. Bộ dụng cụ này sử dụng phương pháp chụp ELISA để phát hiện IgM kháng HAV.Kháng thể IgM kháng người (μchain) của chuột tinh khiết được phủ trên pha rắn của nhiều giếng.
2. HAV-Ag liên hợp được thêm vào các giếng tráng sau khi đã thêm và ủ mẫu đã pha loãng.Sau đó, peroxidase của cải ngựa có nhãn HAV-Ag được thêm vào.Nếu HAV-IgM có trong mẫu, một phức hợp của Anti-μ-chain-HAV-IgM –HAV-Ag-được gắn nhãn với HRP sẽ hình thành.
3. Rửa giếng để loại bỏ các thành phần huyết thanh không kết dính khác, ủ với chất nền (TMB) để tạo thành sản phẩm có màu, và đo độ hấp thụ ở bước sóng 450nm để chỉ ra sự có mặt hay không có HAV-IgM trong mẫu.
4. Thử nghiệm đặc biệt, nhạy, có thể tái tạo và dễ vận hành.

2. TÀI LIỆU CUNG CẤP

1. Tấm Microwell tráng chống chuỗi μ-chuỗi 1 khối (96wells)
2. Enzyme Conjugant (HAVAg-HRP) 1 chai (6ml)
3. Conjugate HAV-Ag 1 chai (6ml)
4. Huyết thanh kiểm soát âm tính 1 lọ (1ml)
5. Huyết thanh kiểm soát tích cực 1 lọ (1ml)
6. 20 X Wash Buffer (pha loãng trước khi sử dụng) 1 chai (30ml)
7. Chất nền A 1 chai (6ml)
8. Chất nền B 1 chai (6ml)
9. Dung dịch Dừng (H2SO4 2M) 1 chai (6ml)
10. Túi nhựa 1 túi
11. Giấy Seal 3 miếng
12. Hướng dẫn sử dụng mỗi thứ 1

3. Quy trình kiểm tra

1. Mang Bộ dụng cụ ELISA tìm IgM kháng thể kháng vi rút viêm gan A (tất cả thuốc thử) và mẫu đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng (khoảng 30 phút).

2. Pha loãng dung dịch đệm rửa đậm đặc 1:19 bằng ddH2O.

3. Pha loãng mẫu (1: 1000) bằng nước muối sinh lý.

4. Đối với mỗi bài kiểm tra, đặt một mẫu trắng, hai đối chứng dương tính và ba đối chứng âm tính.Thêm 100μl huyết thanh đối chứng dương tính và âm tính vào các giếng đối chứng dương tính và âm tính tương ứng.

5. Thêm 100μl mẫu đã pha loãng vào các giếng thử nghiệm khác.

6. Dùng giấy bịt kín các giếng, sau đó ủ 30 phút ở 37 ° C.

7. Đổ bỏ chất lỏng trong tất cả các giếng và đổ đầy các giếng bằng dung dịch rửa.Đặt sang một bên trong 15 giây, loại bỏ chất lỏng trong tất cả các giếng và đổ dung dịch rửa vào các giếng.Lặp lại 5 lần và làm khô giếng sau lần rửa cuối cùng.

8. Thêm 50 μl HAV-Ag liên hợp vào mỗi giếng trừ chỗ trống.

9. Thêmμl 50 μl Enzyme Conjugant vào mỗi giếng ngoại trừ chỗ trống

10. Đậy kín các giếng bằng giấy trám, sau đó ủ 30 phút ở 37 ° C.

11. Lặp lại bước 7.

12. Thêm lần lượt 50 μl chất nền A và B vào mỗi giếng, trộn nhẹ tránh ánh sáng và ủ 15 phút ở 37 ° C.

13. Thêm vào mỗi giếng 50μl dung dịch ngừng phản ứng, kể cả giếng trắng.

14. Đo độ hấp thụ ở bước sóng 450 nm so với mẫu trắng, hoặc đo độ hấp thụ ở bước sóng 450 nm / 630-690 nm.