Bộ KIT xét nghiệm ELISA Irisin của người

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

Bộ kit này cho phép xác định nồng độ Irisin trong huyết thanh, huyết tương và các dịch sinh học khác của người

Quy trình xét nghiệm

1. Pha loãng và thêm mẫu: Pha loãng Tiêu chuẩn mật độ ban đầu theo bảng sau:

2. Thêm mẫu: Đặt riêng các giếng trắng (các giếng so sánh trắng không thêm mẫu và thuốc thử HRP-Conjugate, các thao tác khác ở mỗi bước là như nhau). Giếng mẫu thử nghiệm. Thêm 50μl tiêu chuẩn vào tấm Microelisa, thêm 40μl dung dịch pha loãng mẫu vào giếng mẫu thử nghiệm, sau đó thêm 10μl mẫu thử nghiệm (độ pha loãng cuối cùng của mẫu là 5 lần), thêm mẫu vào giếng, không chạm vào thành giếng càng xa càng tốt và Trộn nhẹ nhàng.

3. Ủ: Sau khi đóng tấm bằng màng đậy tấm, ủ trong 30 phút ở 37℃.

4. Cấu hình chất lỏng: Dung dịch rửa 30 lần (hoặc 20 lần) được pha loãng 30 lần (hoặc 20 lần) với nước cất và dự trữ.

5. Rửa: Mở màng đậy tấm, bỏ chất lỏng, làm khô bằng cách lắc, thêm dung dịch rửa vào mỗi giếng, giữ trong 30 giây rồi xả, lặp lại 5 lần, làm khô bằng cách vỗ nhẹ.

6. Thêm enzyme: Thêm thuốc thử HRP-Conjugate 50μl vào mỗi giếng, trừ giếng trắng.

7. Ủ: Vận hành với 3.

8. Rửa: Vận hành với 5.

9. Màu: Thêm 50ul Dung dịch tạo màu A và 50ul Dung dịch tạo màu B vào mỗi giếng, tránh ánh sáng trong 10 phút ở 37℃

10. Ngừng phản ứng: Thêm 50μl Dung dịch dừng vào mỗi giếng, Ngừng phản ứng (màu xanh lam chuyển sang màu vàng).

11. xét nghiệm: lấy giếng trắng làm không, Đọc độ hấp thụ ở 450nm sau khi Thêm Dung dịch dừng và trong vòng 15 phút.

Yêu cầu về mẫu bệnh phẩm

1. Chiết xuất càng sớm càng tốt sau khi thu thập mẫu vật, và theo tài liệu liên quan, và nên thí nghiệm càng sớm càng tốt sau khi chiết xuất. Nếu không thể, mẫu vật có thể được giữ ở -20 ℃ để bảo quản, Tránh chu kỳ đông-tan lặp lại.

2, Không thể phát hiện mẫu có chứa NaN3, vì NaN3 ức chế hoạt tính HRP.

3. Chiết xuất càng sớm càng tốt sau khi thu thập mẫu vật, và theo tài liệu liên quan, và nên thí nghiệm càng sớm càng tốt sau khi chiết xuất. Nếu không thể, mẫu vật có thể được giữ ở -20 ℃ để bảo quản, Tránh chu kỳ đông-tan lặp lại.

4. Không thể phát hiện mẫu có chứa NaN3, vì NaN3 ức chế hoạt tính HRP.

Lưu ý quan trọng

• Bộ kit lấy ra khỏi môi trường bảo quản lạnh nên được cân bằng 15-30 phút ở nhiệt độ phòng, các tấm ELISA được tráng nếu chưa sử dụng hết sau khi mở, tấm nên được bảo quản trong túi kín.
• Dung dịch rửa sẽ kết tinh phân tách, nó có thể được làm nóng nước giúp hòa tan khi pha loãng. Rửa không ảnh hưởng đến kết quả.
• Thêm Mẫu bằng máy lấy mẫu Mỗi bước, Và hiệu đính độ chính xác của nó thường xuyên, tránh sai sót thí nghiệm. thêm mẫu trong vòng 5 phút, nếu số lượng mẫu nhiều, nên sử dụng Volley.
• nếu hàm lượng vật liệu thử nghiệm quá cao (OD mẫu lớn hơn giếng tiêu chuẩn đầu tiên), vui lòng pha loãng Mẫu (n lần), Vui lòng pha loãng và nhân với hệ số pha loãng. (×n×5).
• Màng đậy tấm chỉ giới hạn sử dụng một lần, để tránh nhiễm chéo.
• Chất nền tránh ánh sáng.
• Vui lòng tuân theo hướng dẫn sử dụng nghiêm ngặt, Việc xác định kết quả xét nghiệm phải lấy máy đọc tấm vi mô làm tiêu chuẩn.
• Tất cả các mẫu, dung dịch rửa và mỗi loại chất thải nên được xử lý theo quy trình vật liệu lây nhiễm.
• Không trộn thuốc thử với các lô khác.