Tên sản phẩm

Bộ phát hiện RT-PCR thời gian thực HDV (vi-rút viêm gan D)

Sử dụng dự định

Đối vớiin vitro phát hiện chất lượng của HDV RNAtrong huyết thanh hoặc huyết tương của người.chẩn đoán, theo dõi và định lượng tải lượng viruscủa nhiễm virus viêm gan D.

Các thông số kỹ thuật:

Nguyên tắc kiểm tra

• RT-PCR thời gian thực: Mục tiêu là một khu vực được bảo tồn củaBộ gen HDV(ví dụ:R0hoặcHDAggen) sử dụngTrình khởi tạo theo trình tự cụ thể và các đầu dò TaqMan(ví dụ: FAM-labelled).

• Độ nhạy cao và đặc tính: Không có phản ứng chéo với HBV, HCV hoặc các virus viêm gan khác.

• Kiểm soát nội bộ (IC): Bao gồm để theo dõi chiết xuất RNA và ức chế PCR (ví dụ, RNase P hoặc kiểm soát RNA tổng hợp).

Các thành phần của bộ

1. RT-PCR Master Mix: Bao gồmtranscriptase ngược, Taq polymerase khởi động nóng, dNTP và bộ đệm tối ưu.

2. Trộn Primer/Probe: Oligonucleotide đặc trưng cho HDV với đầu dò huỳnh quang (ví dụ: FAM cho HDV, HEX / VIC cho IC).

3. Kiểm soát:

   • Kiểm soát tích cực: HDV RNA tổng hợp hoặc virus vô hoạt.

   • Kiểm soát âm: Nước không chứa nuclease.

   • Kiểm soát nội bộ(nếu bao gồm).

4. Các chất phản ứng khác: DNase/RNase không chứa nước, ống phản ứng (nếu có).

Dòng công việc

1. Chuẩn bị mẫu: Vật liệu chiết xuất RNA virus (thể hợp vớiQIAamp, MagMAX hoặc hệ thống tự động)

2. Thiết lập PCR: Trộn RNA chiết xuất với hỗn hợp chính và primers / probe.

3. Tăng cường:

   • Phân chép ngược50°C trong 10-15 phút.

   • Tác dụng PCR: 95°C trong 2~5 phút.

   • Đi xe đạp: 40 45 chu kỳ 95 °C (10 giây) → 60 °C (30 60 giây, đọc huỳnh quang).

4. Phân tích:

   • Số lượng: đường cong tiêu chuẩn cho tải virus (IU / mL hoặc bản sao / mL).

   • Chất lượng: Ct giá trị giới hạn cho kết quả dương tính/hấp tính.

Đặc điểm hiệu suất

• Nhạy cảm:≤ 10 ≈ 50 IU/mL(95% LOD).

• Phạm vi tuyến tính:102108 IU/mL(bộ số lượng).

• Đặc tính: Không có phản ứng chéo với HBV, HCV, HIV hoặc các mầm bệnh phổ biến khác.

• Chọn chính xác: CV < 5% đối với biến thể trong và giữa các phân tích.

•